Подарить счастье
стать родителями

Предимплантационная диагностика

Записаться на прием

 

ЭКО является не только высокоэффективным методом лечения бесплодия, но и вспомогательным методом диагностики многих наследственных заболеваний до наступления беременности.

Дополнительной процедурой к вспомогательным репродуктивным технологиям является преимплантационная генетическая диагностика эмбрионов – ПГД (PGD) или преимплантационное генетическое тестирование – ПГТ. Главное преимущество данного метода - отсутствие селективного прерывания беременности, а также высокая вероятность рождения ребёнка без диагностируемого генетического заболевания.

ПГД — это проверка эмбриона, полученного с использованием экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) на наличие генетических аномалий до его имплантации в полость матки. В этом случае возможно отобрать здоровые эмбрионы еще до стадии переноса.

Настоящая технология применяется почти 30 лет, и с каждым годом ее востребованность растет вместе с увеличением количества женщин, желающих родить после 35 лет. Манипуляция выполняется только при ЭКО, не предоставляет угрозы для женщины и не влияет на будущую беременность. Во время естественного зачатия провести такое исследование невозможно, но как альтернативный метод проводят пренатальную диагностику.

Однако, при получении негативных результатов обследования - паре будет предложено прервать беременность. Преимплантационная диагностика наследственных болезней позволяет избежать этого, так как манипуляция предоставляет максимум информации о зародыше, что дает возможность отобрать самые качественные клетки.

Процедуру проводят не всем, только, когда известно, что родители либо болеют, либо носители моногенного заболевания. Таким образом, можно определить, унаследует ли ребенок хромосомные патологии от родителей или нет. У пар, страдающих бесплодием, проводят не тестирование, а скрининг, поэтому потребность в таком исследовании небольшая.

Обследование выполняется для исключения мутаций или несбалансированной хромосомной перестройки. Перенос недиагностированных бластоцист не проводится.

В настоящее время известно более 40 моногенных генетических заболеваний. Самые распространенные:

1Муковисцидоз
2Спинальная мышечная атрофия
3Нейросенсорная тугоухость
4Фенилкетонурия
5Адреногенитальный синдром
6Синдром Мартина-Белл (ломкая Х хромосома)
7Бета-галактоземия

Типы ПГД

ПГС – преимплантационный генетический скрининг. 

ПГТ – преимплантационное генетическое тестирование – то же самое, что и диагностика. Под диагностикой понимают анализ методом FISH по определенному числу хромосом, а под тестированием – методом CGH/NGS с диагностикой всех хромосомных пар.

Несколько типов ПГТ исследований: 

ПГТ-А – анализ анеуплоидий выявляет лишние или недостающие хромосомы в клеточном ядре, то есть направлен на выбор бластоцист с нормальным количеством хромосом. Он позволяет быстрее получить желаемую беременность (повышает шансы до 70-75%) и избежать переноса анеуплоидов, например, с синдромом Дауна.

ПГТ-М – тестирование на наличие наследственных болезней. Диагностика проводится только на выявление конкретной патологии, поэтому необходима дополнительная диагностика родителей для уточнения, в каком участке гена могла произойти мутация. Данный тип исследования гарантирует отсутствие конкретного дефекта, но не дает гарантии на отсутствие других нарушений в геноме.

ПГТ – SR – тестирование на наличие специфических перестроек в их ДНК, которые так же могут приводить к разным заболеваниям и передаваться по наследству.


Чтобы определить, какой метод диагностики будет наиболее эффективным для вашей пары, нужно записаться на консультацию к генетику.

Показания к проведению

Преимплантационное обследование рекомендуется парам с рисками передачи известных хромосомных аномалий своим детям. Наличие показаний для осуществления ПГД первоначально определяет репродуктолог, а решение о целесообразности такого исследования принимает врач-генетик. Оно может быть проведено в протоколе экстракорпорального оплодотворения за свой счет. Противопоказаний к проведению нет.

  • Пары с Х-сцепленными нарушениями (риск для ребёнка 25%, половина из них мужского пола);
  • Пары с хромосомными транслокациями, которые могут вызвать отсутствие имплантации, невынашивания беременности, или психические или физические нарушения у детей;
  • Носители аутосомно-рецессивных расстройств (риск для ребёнка составляет 25%);
  • Носители аутосомно-доминантный расстройств (риск для ребёнка составляет 50%).

Примерами распространенных заболеваний могут служить:

  • муковисцидоз,
  • фенилкетонурия,
  • болезнь Тэй-Сакса,
  • болезнь Гоше,
  • пигментный ретинит,
  • серповидно-клеточная анемия,
  • талассемия,
  • анемия Фанкони,
  • гемофилия,
  • миодистрофия Дюшенна,
  • миодистрофия Бейкера,
  • пузырчатка,
  • поликистоз почек,
  • болезнь Альцгеймера,
  • ретинобластома,
  • семейный рак груди,
  • семейный аденоматозный полипоз,
  • семейный канцероидный синдром,
  • нейрофиброматоз,
  • гидроцефалия,
  • хорея Гентингтона,
  • синдром Х-ломкой хромосомы,
  • спиноцеребральная атаксия.

Делать ли ПГД?

Преимплантационное тестирование может потребоваться в следующих случаях:

  • Возраст партнеров – женщин от 35 лет, а мужчины от 40;
  • Невынашивание беременности, повторные самопроизвольные аборты, замершие беременности;
  • Неудачные попытки ЭКО (две и более) в анамнезе;
  • Генетические отклонения были ранее выявлены у детей или у плода;
  • Причины мужского бесплодия;
  • Тяжёлые нарушения сперматогенеза;
  • Наличие у родителей наследственных болезней, имеющих половую принадлежность;
  • Присутствие высокого риска рождения ребенка с моногенным заболеванием (например, с муковисцидозом, спинальной мышечной атрофией, фенилкетонурией и другими патологиями);
  • Возможность резус-конфликта между матерью и будущим ребенком.

По желанию пар можно сделать ПГД эмбриона на:

  • Определения пола
  • Тестирования на совместимость по человеческим лейкоцитарным антигенам (HLA)
  • Исключения болезней с поздним проявлением (болезнь Альцгеймера, РМЖ)
  • Исключения болезней, не угрожающих жизни
  • Тестирования наследственных предрасположенностей

Супружеские пары, которые не могут забеременеть естественным путем, получают консультацию генетика. Специалист при необходимости назначает анализы с целью определения кариотипа и дает индивидуальные рекомендации относительно необходимости проведения ПГД перед переносом.

ПГД эмбриона цена

Биопсия

Биопсия трофэктодермы 1 эмбриона 17 000
Биопсия трофэктодермы 2 эмбриона 21 000
Биопсия трофэктодермы 3 эмбриона 25 000
Биопсия трофэктодермы 4 эмбриона 29 000
Биопсия трофэктодермы 5-8 эмбрионов 33 000
Биопсия трофэктодермы 9-12 эмбрионов 37 000
Биопсия трофэктодермы 13 и более эмбрионов 41 000
Доплата за биопсию 4000

Криоконсервация, витрификация, хранение

Последующее хранение криоконсервированных эмбрионов (в год) 10 000
Криоконсервация (в т.ч. методом витрификации эмбрионов (бластоцист)) до 4 криотопов  (хранение не включено, оплачивается отдельно) 22 000

Генетика

Преимплантационное генетическое тестирование на хромосомные аномалии (ПГТ-А) методом (NGS) - 1 эмбрион 23 500
ПГТ моногенного заболевания 1 категории сложности, включая подготовительный этап (заболевания, для которых разработаны элементы тест-системы). 
150 000
Контроль за культивированием эмбрионов в эмбриоскопе
20 000
ПГТ моногенного заболевания 1 категории сложности, включая подготовительный этап (заболевания, для которых разработаны элементы тест-системы)
150 000
Определение уровня рецептивности эндометрия – тест  ERA
89 000
Определение микрофлоры эндометрия – тест EMMA  
49 000
Определение патогенной микрофлоры эндометрия – тест  ALICE  
35 000
Комбинированный тест ENDOMETRIO  определение уровня рецептивности (тест ERA, микробиоты (тест EMMA) и патогенной микрофлоры эндометрия (тестАLICE)

106 000

 

Техника проведения манипуляции

Предимплантационное обследование рекомендуется парам с рисками передачи известных хромосомных аномалий своим детям. Наличие показаний для осуществления ПГД первоначально определяет репродуктолог, а решение о целесообразности такого исследования принимает врач-генетик. Оно может быть проведено в протоколе экстракорпорального оплодотворения за свой счет. Противопоказаний к проведению нет.

С чего начинается ПГД?

Подготовка к лечебному циклу ЭКО с ПГД практически 
не отличается от обычного лечебного цикла ЭКО:

  • женщина принимает гормональные препараты для стимуляции суперовуляции;
  • производится забор фолликулов с помощью пункции через влагалище;
  • в условиях эмбриологической лаборатории проводится оплодотворение (ЭКО/ИКСИ) яйцеклеток сперматозоидами;
  • культивирование в специальных условиях;
  • тщательный отбор, отдается предпочтение нормально делящимся и морфологически полноценным зародышам;
  • лабораторная биопсия трофэктодермы на 5-6 день культивирования (с помощью механического или лазерного метода), фиксация бластомера. Ранее ПГД проводилось на 3 день культивирования, однако проведение биопсии на этом этапе заметно снижает жизнеспособность эмбрионов. В то же время забор клеток на 5 день после оплодотворения не влияет на их дальнейшее развитие.
  • криоконсервация после биопсии трофэктодермы;
  • генетический тест зафиксированных клеток и получение результатов;
  • эмбриотрансфер в полость матки эмбрионов без генетических дефектов;
  • через две недели стандартная процедура диагностики беременности.

Сопутствующие риски и результаты исследования зависят от навыков и квалификации эмбриолога, проводящего биопсию. Такая процедура относится к высокотехнологичным и дорогим исследованиям. Поэтому предпочтительно сразу обращаться в крупные специализированные центры с возможностью проведения цитогенетического тестирования.

Результаты

По прошествии двух суток специалисты оценивают результаты и сопоставляют их с развитием соответствующего зародыша.

Если у него обнаружены отклонения, это означает обязательный отказ от переноса. В полость матки переносятся только те эмбрионы, у которых не было обнаружено патологий. Если исследование проводилось с цель рождения ребенка определенного пола (только по показаниям) или для предотвращения резус-конфликта, то подсаживаются соответствующие эмбрионы.

Схема ПГД применяется для конкретного случая своя. Если нарушение наследуется от женщины, то можно тестировать только полярные тельца. Можно также тестировать только бластомеры. Либо может проводиться последовательное изучение полярных телец, затем бластоцист. Какая именно схема будет применяться, определяется на консультации с врачом-генетиком.

Трофэктодерма: что это такое

В настоящее время предпочитают проводить биопсию трофэктодермы, а не забирать образцы еще не дифференцированной эмбриональной ткани. Такой подход позволяет увеличить жизнеспособность зародышей и минимизировать вред от манипуляции PGD.

Развитие эмбриона происходит по определенным закономерностям. После оплодотворения образуется зигота, которая начинает активно делиться, и количество зародышевых клеток растет в геометрической прогрессии. Продолжительность этого этапа до 3–4 суток. Затем происходит разделение клеток на 2 порции: наружную и внутреннюю. В толще эмбриональной клеточной массы формируется эксцентричная внутренняя полость – бластоцель, а достигшие этого этапа называются бластомерами. Трофэктодерма – наружный слой бластомера. Она является предшественником внезародышевых тканей, необходимых для нормальной имплантации эмбриона и последующего формирования плаценты. А внутренняя клеточная масса бластомера дает начало самому зародышу.

Внешний и внутренний листки бластоцисты имеют практически идентичный генный и хромосомный состав, поэтому информативность анализа трофэктодермы такая же высокая, как и при исследовании на более ранних этапах развития зародыша.

На какой день выполняют диагностику

На этапе подготовке к ЭКО у пар часто возникают вопросы: сколько делается ПГД и когда следует эмбриоперенос. Во многих клиниках, преимплантационная генетическая диагностика эмбрионов выполняется на 3 сутки. После оплодотворения яйцеклеток сперматозоидами в условиях эмбриологической лаборатории эмбрион развивается — клетки делятся. На третий день количество клеток достигает 6-8, что позволяет провести генетический анализ эмбриона без ущерба для дальнейшего развития зародыша.

В этот день происходит биопсия, то есть извлечение одного бластомера с помощью специальных микроинструментов. При стандартном протоколе без криоконсервации исследование выполняется за короткое время, так как эмбрион не может продолжать развиваться вне организма матери далее стадии бластоцисты (5-е сутки после оплодотворения). Пока выполняется генетическая диагностика, эмбрионы продолжают развиваться в соответствующей культуральной среде, после чего переносятся в полость матки на 5-е сутки развития. К этому времени эмбрион достигает стадии бластоцисты. Альтернативный подход – анализ ПГД в криоцикле. В этом случае биопсия производится на 5 день развития, а затем они подвергаются криоконсервации. Если в протоколе без верификации у эмбриологов остается не больше 48 часов для анализа, то в криоцикле специалист в течение месяца проводит генетическую диагностику.

Практика разобщённого цикла по сравнению со стандартным протоколом без криконсервации характеризуется: меньшим риском гиперстимуляции, большим количеством материала и временем для анализа, а также менее травматичной для эмбриона процедурой биопсии. В зависимости от вида протокола ЭКО специалисты индивидуально выбирают сроки проведения ПГС.

Используемые методы ПГД

У каждого метода свои преимущества и недостатки. Основные различия связаны с хромосомным числом, точностью результата и ценой процедуры.

Многоцветная FISH - флуоресцентная гибридизация применяется для числовых и структурных хромосомных поломок. С помощью FISH- гибридизации исследуется только часть хромосом: три, пять или семь хромосом, чаще всего хромосомы - 13, 18, 21, X и Y. Так как некоторые хромосомы остаются непроверенными, то этот метод не гарантирует высокую точность результата, но выявляет распространенные генетические заболевания.
Сравнительная геномная гибридизация на микрочипах CGH/aCGH (comparative genomic hybridization) тестирует все 23 хромосомы одновременно, поэтому обеспечивает высокую результативность в отбраковке зародышей с анеуплоидией. Стоимость CGH выше, чем FISH.

При исследовании моногенных заболеваний применяются методы на основе ПЦР. Полимеразная цепная реакция многократно и избирательно копирует определенный геномный сегмент, который содержит ген для его дальнейшего исследования.

NGS - секвенирование нового поколения (next-generation sequencing) – это метод определения последовательности нуклеотидов ДНК, метод расшифровки генома человека. В настоящее время это наиболее распространенный метод оценки генетического статуса эмбриона. Он определяет изменения генов, связанные с полом, наследственные и эмбриональные мозаичные мутации. С помощью секвенирования удается избежать множества ошибок в диагностике, так как метод имеет очень высокую чувствительность и специфичность.

ПГД эмбриона: за и против

Преимущества

Сегодня такое обследование является альтернативным способом снижения вероятности беременности больным плодом и рождения ребёнка с генетическим заболеванием. Необходимо учитывать, что ПГД не может быть полной заменой пренатальной диагностики.

Преимущества тестирования:

1 Выбор и перенос в матку только тех эмбрионов, которые не имеют хромосомных патологий
2 Снижение риска самопроизвольного прерывания беременности на ранних сроках
3 Снижение риска рождения ребёнка с определёнными дефектами
4 Снижение риска невынашивания беременности (примерно в 2 раза)
5 Снижение риска многоплодной беременности (примерно в 2 раза)
6 Увеличение шанса на успешную имплантацию (примерно на 10 %)
7 Увеличение шансов на благополучное рождение ребёнка (примерно на 15-20 %).

Стоит подчеркнуть, что когда женщины, находящиеся в старшей возрастной группе (40+) принимают решение зачать ребенка с помощью ЭКО, то диагностика генетических нарушений является самым разумным подходом, позволяющим повысить шансы на здоровое потомство.

Риски

1 возможность случайного повреждения зародыша (< 1%)
2 ошибки (до 10%)
3 вероятность ошибочной диагностики эмбриона с патологией, как нормального (3,5%)
4 вероятность ошибочной диагностики нормального эмбриона, как патогенного (10%)
5 отмена процедуры из-за того, что во всех зародышах была найдена патология (до 20%)

Основные недостатки методики:

- Возможность повреждения эмбриона при недостаточной квалификации врача (менее 1%).

- Получение ложноотрицательных и ложноположительных результатов при наличии у зародыша клеточного мозаицизма (состояние, при котором в организме присутствуют клетки с 2 и более вариантами кариотипа, при этом, чаще всего, один пул клеток содержит нормальный кариотип, а другие – «патологический»). При использовании современного цитогенетического теста такой риск существенно снижается (не более 10%).

- Длительность анализа ведет к откладыванию момента эмбриопереноса и использованию криоконсервации. Однако эмбриологи утверждают, что процедуру следует выполнять с последующей витрификацией. Это не только позволяет осуществить доскональное тестирование, но и осуществить перенос в естественном цикле, что значительно снизит нагрузку на женский организм и создает условия, максимально близкие к естественному оплодотворению.

- Высокая стоимость методики. Ее проведение ощутимо повышает стоимость протокола ЭКО.

- Необходимость прохождения лечебного цикла ЭКО при генетических заболеваниях родителей.

ПГД – это сложнейшая манипуляция по изъятию у бластомера нескольких клеток, которая должна быть проведена специалистом, прошедшим специальную подготовку и имеющим опыт осуществления таких исследований. Во всем мире возможность проведения такого обследования ограничивается стоимостью.

Цены в Санкт-Петербурге приблизительно одинаковы во всех клиниках, так как само тестирование выполняется ограниченным числом лабораторий, которые имеют необходимое оборудование и обученный персонал. Разница между клиниками в наличии эмбриологов, умеющих проводить биопсию бластомеров.

 

Записаться на прием